Mario Kart DS est la continuation de la série de jeux de course de longue durée qui a commencé sur la Super Nintendo. Il propose 16 nouvelles pistes ainsi que 16 pistes des 4 jeux précédents, chaque ensemble s'est séparé respectivement en nitro et rétro Grand Prix. Huit coureurs sont initialement disponibles, chacun avec deux karts à choisir. Un certain nombre de caractères et de karts supplémentaires sont également disponibles pour déverrouiller. De nouveaux articles ont été ajoutés à l'arsenal, y compris un calmar de bêtises qui gicle l'encre sur les écrans d'autres joueurs et une balle de balle qui transforme le joueur en une balle géante et rapide sur le pilote automatique.